多酚氧化酶(PPO)測試盒應該這樣使用！
更新時間：2025-10-28 | 點擊率：68
多酚氧化酶(PPO)測試盒的整個測試過程大約只需50分鐘即可完成，并且一次可以測定約100例樣本，大大提高了工作效率。每個樣本僅需取100微升(ul)，減少了試劑消耗的同時降低了對珍貴樣本的需求。試劑盒可以在2～8℃的條件下保存長達6個月仍然有效，保證了長期使用的可行性和數據的一致性。變異系數CV=1.7.表明該測試方法具有較高的重復性和可靠性，意味著不同批次間的實驗結果較為一致。
由于采用了優化設計的試劑配方，使得檢測限更低，同時背景干擾小，從而提高了檢測的準確性；適用于多種類型的生物樣本，包括組織、血清、血漿及相關液體樣本，為科研工作者提供了便利。在生物學研究、食品工業等領域得到了廣泛應用。它不僅簡化了復雜的實驗操作，提高了工作效率，而且確保了實驗結果的準確性和可靠性。
多酚氧化酶(PPO)測試盒的測定步驟：
1.樣品準備
-取材與研磨：選取新鮮的植物組織或其他含PPO的材料，迅速置于預冷的研缽中，加入適量的提取緩沖液(通常由試劑盒提供或按要求配制)，在低溫環境下充分研磨成勻漿。注意盡量保持操作過程在冰上進行，以減少酶活性的損失。
-離心分離：將研磨好的勻漿轉移到離心管中，使用臺式離心機在一定轉速下離心一定時間，使細胞碎片等雜質沉淀下來，得到上清液即為粗酶提取液。如果懸浮細胞用此法時必須經離心后才能吸出上清再加二甲基亞砜(DMSO)。
2.反應體系構建
-添加底物和緩沖液：按照試劑盒說明書的要求，向比色皿或試管等反應容器中依次加入特定的底物(如鄰苯二酚)、適量的反應緩沖液以及一定量的粗酶提取液。不同品牌的測試盒可能會有不同的配方和用量要求，需嚴格按照說明操作。
-混勻并保溫：輕輕混勻反應體系中的各種成分，然后將反應容器放置在適宜的溫度條件下(一般為室溫或特定的恒溫水浴鍋中)進行保溫孵育，讓酶與底物充分接觸并發生反應。
3.吸光度測定
-選擇波長：根據該測試盒的原理，PPO能夠催化鄰苯二酚產生醌，后者在525nm處有特征光吸收。使用可見分光光度計在此波長下測量反應體系的吸光度值。
-定時讀數：在規定的時間節點(通常是每隔一段時間)讀取一次吸光度值，記錄數據。通過測量單位時間內吸光度的變化量來計算PPO的活性。
4.數據處理與分析
-繪制標準曲線(若有對照品)：如果試劑盒配備了已知濃度的標準品，可根據標準品測得的數據繪制標準曲線，然后根據樣品的吸光度值從標準曲線上查出對應的酶活性單位。
-計算結果：根據公式和所測得的數據計算出樣品中PPO的活性，并對結果進行分析和比較。
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